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描述：測(cè)定意義SSS（EC 2.4.1.21）通常以游離態(tài)存在于質(zhì)體基質(zhì)中，催化淀粉鏈延長(zhǎng)，主要負(fù)責(zé)支鏈淀粉的合成。可溶性淀粉合成酶（SSS）檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品型號(hào)：廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家更新時(shí)間：2019-11-07訪問(wèn)量：506標(biāo)題：可溶性淀粉合成酶（SSS）檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品概述
可溶性淀粉合成酶(SSS)檢測(cè)試劑盒
測(cè)定原理
SSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng)，將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上，同時(shí)生成ADP，在反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH，NADPH生成量與前一步反應(yīng)中ADP生成量呈正比，340nm下測(cè)定NADPH增加量即可計(jì)算SSS活性。
需自備的的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存；
液體一：7mL×2瓶，4℃保存；
液體二：4mL×2瓶，4℃保存；
液體三：8mL×2瓶，4℃保存；
粉劑一：2支，4℃保存；
粉劑二：2支，4℃保存；
粉劑三：2支，-20℃保存；
粉劑四：2支，4℃保存；
粉劑五：2支，4℃保存；
粉劑六：2支，-20℃保存；
粉劑七：2支，-20℃保存；
粉劑八：2支，4℃保存；
粉劑九：2支，4℃保存；
粉劑十：2支，-20℃保存；
試劑一：粉劑×1支，-20℃保存；臨用前加入500μL雙蒸水，充分溶解備用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：粉劑×1支，-20℃保存；臨用前加入500μL雙蒸水，充分溶解備用，用不完的試劑4℃保存；
反應(yīng)液Ⅰ的配制：臨用前取液體一、粉劑一、粉劑二和粉劑三各一支，依次把粉劑一、粉劑二和粉劑三轉(zhuǎn)移到液體一中混合溶解。這樣可以分兩批配制并且測(cè)定。
反應(yīng)液Ⅱ的配制：臨用前取液體二、粉劑四、粉劑五、粉劑六和粉劑七各一支，依次把粉劑四、粉劑五、粉劑六和粉劑七轉(zhuǎn)移到液體二中混合溶解。這樣可以分兩批配制并且測(cè)定。
反應(yīng)液Ⅲ的配制：臨用前取液體三、粉劑八、粉劑九和粉劑十各一支，依次把粉劑八、粉劑九和粉劑十轉(zhuǎn)移到液體三中混合溶解。這樣可以分兩批配制并且測(cè)定。
粗酶液制備
稱取約0.1g組織加入1mL提取液，冰浴中勻漿。10000g ，4℃離心10分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟
試劑名稱（μL） | 測(cè)定管 |
樣本 | 150 |
反應(yīng)液Ⅰ | 270 |
混勻，30℃保溫20 min，置沸水浴中1 min（蓋緊，防止水分散失），冰浴冷卻
反應(yīng)液Ⅱ | 150 |
混勻，30℃保溫30 min，置沸水浴中1 min（蓋緊，防止水分散失），
冰浴冷卻，10000g 常溫離心10min，取上清液
上清液 | 450 |
反應(yīng)液Ⅲ | 300 |
試劑一 | 10 |
試劑二 | 10 |
混勻后立即在340 nm波長(zhǎng)下記錄初始吸光度A1和 2min后的吸光度A2，計(jì)算ΔA=A2-A1。
注意：反應(yīng)液Ⅰ如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混勻。
可溶性淀粉合成酶(SSS)檢測(cè)試劑盒
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